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新型コロナウイルス(SARS-Cov-2)核酸検出キット

簡単な説明:


  • FOB価格:US $0.8 - 1 / 個
  • 最小注文数量:10000個/個
  • 供給能力:10000000 個/月/個
  • :
  • 製品詳細

    製品タグ

    New Cオロnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

    (Flu鉱石scent RT-PCR Probe Method) Product Manual

    Pロドゥクt name 新型コロナウイルス(SARS-Cov-2)核酸検出キット(蛍光RT-PCRプローブ法)

    Packaging specイフィcations 25 テスト/キット

    Intended us

    このキットは、医療提供者によって 新型コロナウイルス感染症 (COVID19) の疑いがある個人からの鼻咽頭ぬぐい液、中咽頭 (喉) ぬぐい液、前鼻ぬぐい液、中鼻甲介ぬぐい液、鼻洗浄液および鼻吸引液中の新型コロナウイルスに由来する核酸の定性的検出に使用されます。新型コロナウイルスのORF1abおよびN遺伝子の検出は、新型コロナウイルス感染症の補助診断や疫学モニタリングに利用できます。

    Principles of the pローズdure 

    このキットは、新型コロナウイルス (SARS-Cov-2) ORF1ab および N 遺伝子配列用に設計された特定の TaqMan プローブおよび特定のプライマー用に設計されています。 PCR 反応溶液には、ターゲットを特異的に検出するための 3 セットの特異的プライマーと蛍光プローブが含まれており、追加の特異的プライマーと蛍光プローブのセットは、内在性ハウスキーピング遺伝子を検出するためのキットの内部標準コントロールとして使用されます。

    テスト原理は、PCR 反応において特定の蛍光プローブが Taq 酵素のエキソヌクレアーゼ活性によって消化および分解され、その結果、レポーター蛍光基と消光した蛍光基が分離され、蛍光モニタリングシステムが蛍光を受信できるようになります。 PCR増幅の濃縮効果により、プローブの蛍光シグナルは設定された閾値-Ct値(サイクル閾値)に達します。標的アンプリコンがない場合、プローブのレポーター グループは消光グループに近くなります。このとき、蛍光共鳴エネルギー移動が起こり、レポーター基の蛍光は消光基によって消光され、蛍光シグナルは蛍光PCR装置では検出できなくなる。

    試験中の試薬の使用を監視するために、キットにはポジティブコントロールとネガティブコントロールが装備されています。ポジティブコントロールには標的部位の組換えプラスミドが含まれ、ネガティブコントロールには環境汚染のモニタリングに使用される蒸留水が含まれています。テストの際には、ポジティブコントロールとネガティブコントロールを同時に設定することをお勧めします。

    Main comポネンts 

     

    Cat. No. BST-SARS-25 BST-SARS-DR-25 コンポエント
    ナムe スペック クオント クオント
    ポジティブコントロール 180μL/バイアル 1 1 人工的に構築されたプラスミド、蒸留水
    ネガティブコントロール 180μL/バイアル 1 1 蒸留水
    SARS-Cov-2 ミックス 358.5μL/バイアル 1 / 特異的プライマーペア、特異的検出蛍光プローブ、dNTP、MgCl2、KCl、Tris-Hcl、蒸留水など
    酵素ミックス 16.5μL/バイアル 1 / Taq酵素、逆転写酵素、UNG酵素など
    SARS-Cov-2 ミックス(凍結乾燥) 25 テスト/バイアル / 1 特異的プライマーペア、特異的検出蛍光プローブ、dNTP、Taq酵素、逆転写酵素、蒸留水など
    2x バッファ 375μL/バイアル / 1 MgCl2、KCl、Tris-Hcl、蒸留水など

    注記( 1) 異なるバッチキットのコンポーネントを混合したり、交換したりすることはできません。

    (2) 試薬:核酸抽出キットをご用意ください。

    Storage condそれons そして expiration date 

    For BST-SARS-25:-20±5℃で長期輸送・保管してください。

    For BST-SARS-DR-25:室温で輸送してください。 -20±5℃で長期保存してください。

    凍結融解を繰り返すことは避けてください。有効期限は12ヶ月を予定しております。

    製造日と使用日についてはラベルをご覧ください。

    最初の開封後、試薬は凍結融解サイクルの繰り返しや試薬の凍結回数を避けるため、-20±5 °C で 1 か月以内、または試薬期間の終了日のいずれか早い方まで保存できます。 -解凍サイクルは 6 回を超えてはなりません。

    Applicable instrumentABI 7500、SLAN-96P、Roche-LightCycle-480。

    Sample requirements 

    1.適用サンプルタイプ:抽出核酸溶液。

    2. サンプルの保存と輸送: -20±5℃で 6 か月間保存します。サンプルの凍結と解凍は 6 回以内に行ってください。

    TEST(東部基準時ing metホッド

    1.Nucleic acid extraction

    ウイルス核酸を抽出するために適切な核酸抽出キットを選択し、対応するキットの説明書に従ってください。 Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. 製の核酸抽出精製キット、または同等の核酸精製キットの使用を推奨します。

    2.  Rそれぞれtion リージnt prepアラtion

    2.1 For BST-SARS-25:

    (1) SARS-Cov-2 Mix と Enzyme Mix を取り出し、室温で完全に溶かし、Vortex 装置で十分に混合し、短時間遠心分離します。

    (2)358.5μLのSARS-Cov-2 Mixに16.5μLのEnzyme Mixを加えてよく混合し、混合反応液を得た。

    (3) 清潔な 0.2 mL PCR オクタル チューブを準備し、ウェルあたり 15 μL の上記混合反応溶液でマークします。

    (4) 精製核酸溶液 15 μL、ポジティブコントロール、ネガティブコントロールを加え、慎重にオクタルチューブのキャップを閉めます。

    (5)上下を逆にしてよく混ぜ、素早く遠心分離してチューブ底の液体を濃縮します。

    1

     

    2.2 For BST-SARS-DR-25:

    ( 1) 375ul 2x Buffer を SARS-Cov-2 Mix(凍結乾燥) に加え、反応混合物を調製します。ピペッティングにより完全に混合し、短時間遠心分離します。 (反応混合物が調製されたら、-20℃で保存することをお勧めします)長期保管になります。)

    (2) 清潔な 0.2 mL PCR オクタル チューブを準備し、ウェルあたり 15 μL の反応混合物でマークします。

    (3) 精製核酸溶液 15μL、ポジティブコントロール、ネガティブコントロールを加え、慎重にオクタルチューブのキャップを閉めます。

    (4)上下を逆にしてよく混ぜ、素早く遠心分離してチューブ底の液体を濃縮します。

    3. PCR ampリフィcation  動作設定については機器のマニュアルを参照してください。

    3. 1 PCR 8 チューブを蛍光 PCR 装置のサンプルチャンバーに置き、検査サンプル、ポジティブコントロール、ネガティブコントロールをロード順序に従ってセットします。

    3.2 蛍光検出チャンネル:

    ( 1) ORF1ab 遺伝子は FAM の検出チャネルを選択します (レポーター: FAM、クエンチャー: なし)。

    (2) N 遺伝子は VIC の検出チャネルを選択します (レポーター: VIC、クエンチャー: なし)。

    (3) 内部標準遺伝子は CY5 の検出チャネルを選択します (レポーター: CY5、クエンチャー: なし)。

    (4) パッシブリファレンスは ROX に設定されます。

    3.3 PCR プログラムのパラメーター設定:

    ステップ 温度(℃) 時間 サイクル数
    1 逆転写反応 50 15分 1
    2 Taq酵素の活性化 95 2.5分 1
    3 Taq酵素の活性化 93 10秒 43
    アニーリング伸長と蛍光取得 55 30秒

    設定後、ファイルを保存し、反応プログラムを実行します。

    4.Results analysis

    プログラム終了後、結果は自動的に保存され、増幅曲線が分析されます。増幅曲線は機器のデフォルトのしきい値に設定されます。

    Explanation of test resuそれ 

    1. 実験の妥当性を判断します。陽性コントロールの FAM、VIC チャネルは典型的な増幅曲線を持つ必要があり、Ct 値は通常 34 未満ですが、機器ごとに異なる閾値設定により変動する可能性があります。ネガティブコントロール FAM、VIC チャネルは非増幅 Ct である必要があります。 上記の要件を同時に満たさなければならないことに同意します。満たさない場合、このテストは無効になります。

    2. 結果判定

    FAM/VIC チャンネル 判定結果
    Ct<37 サンプル検査で陽性反応が出た
    37≦Ct<40 増幅曲線は S 字型になっており、疑わしいサンプルは再検査する必要があります。再検査結果が一致していれば陽性、そうでなければ陰性と判定します。
    Ct≥40 または増幅なし サンプル検査が陰性(またはキットの検出下限未満)である

    注: ( 1) FAM チャネルと VIC チャネルの両方が同時に陽性の場合、SARS-Cov-2 は陽性と判定されます。

    (2) FAM チャネルまたは VIC チャネルが陽性で、もう一方のチャネルが陰性の場合、テストを繰り返す必要があります。同時に陽性であればSARS-Cov-2陽性と判定され、そうでなければSARS-Cov-2陰性と判定されます。


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